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高靈敏度及特異性：可準確識別樣本中低含量的目標檢測物；
快速簡便操作：無需昂貴設備及相關操作經驗；
穩定性：實驗重復性良好，變異系數低；
種類豐富：提供多種選擇性；
實驗數據易于處理分析。
試劑盒標準曲線示例
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以上列表中ELISA試劑盒均采用雙抗體夾心法，此方法是檢測抗原最常用的方法。
雙抗體夾心法ELISA實驗方案
雙抗夾心法是指將特異性結合抗原的抗體包被于微孔板上，制備成固相抗體，向微孔板中分別加入標準品或待測樣本，再與HRP標記另一株特異性針對抗原的抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，加入TMB底物顯色后，形成有色產物，產物的量與樣本中抗原的量呈正相關，再由酸終止反應。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD 值），通過擬合標準曲線計算樣本中抗原含量。
注：雙抗體夾心法必須采用經測試過的配對抗體進行。
ELISA實驗注意事項：
?在臨床檢驗中，此法適用于檢測各種蛋白質等大分子抗原，例如HBsAg、HBeAg、AFP、HCG等。
?只要獲得針對受檢抗原的特異性抗體，就可以用于包被固相載體和制備酶結合物而建立此法。
?如抗體的來源為血清，包被和酶標用的抗體最好分別取自不同種屬的動物。
?如應用單克隆抗體，一般選擇兩個針對抗原上不同決定簇的單抗，分別用于包被固相載體和制備酶結合物。
?這種雙位點夾心法具有很高的特異性，而且可以將受檢標本和酶標抗體一起保溫反應，作一步檢測。
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